世界首个大复方中药研究的破冰之旅（二）

国家自然科学基金项目确立中药痹祺胶囊“金标准”地位

在“从中药整体观念认识中药的复杂性”的研究思路引领下，刘昌孝院士领导的课题组科研人员通过多次试验证明了痹祺胶囊全方配伍组相较于任何一个拆方组，无论在抗炎镇痛消肿，还是在免疫调节方面均表现出更强的药效作用。特别是在对痹祺胶囊进行拆方配伍的药代动力学研究中，首次揭示了臣、佐、使药相互作用对君药药动学的影响，证明了痹祺胶囊复方配伍的科学性。

药物通过合理配伍，可以增强或改变原有功用，调其偏性，消除或减缓对人体的不利因素，才能使各具特性的药物发挥综合治疗作用，充分体现了中医学的整体观念和辩证诊治的思想。以君、臣、佐、使原则为切入点，研究复方配伍后效应成分的药代动力学变化，结合化学成分研究和药理学研究，为阐明复方物质基础和作用机制提供现代科学依据。

这一突破性进展使科研人员信心倍增，继续向新的领域奋进。研究中，科学家们及时地将大量系统生物学、化学生物学的理论、方法，整合于中药复杂体系的疗效基础研究与疗效机制研究中，让传统的中医药融入现代科学技术体系。

在“从中药整体观念认识中药的复杂性”的研究思路引领下，刘昌孝院士领导的课题组科研人员通过多次试验证明了痹祺胶囊全方配伍组相较于任何一个拆方组，无论在抗炎镇痛消肿，还是在免疫调节方面均表现出更强的药效作用。特别是在对痹祺胶囊进行拆方配伍的药代动力学研究中，首次发现士的宁和马钱子碱在单体组和君药组的药动学参数没有显著差别，而痹祺胶囊全药组能够显著延长士的宁和马钱子碱的血药浓度达峰时间，降低峰浓度，并显著延长有效浓度在体内的滞留时间，但不影响其吸收总程度。臣药组和佐药组均能显著延长士的宁和马钱子碱的达峰时间，延缓吸收。该研究首次揭示了臣、佐、使药相互作用对君药药动学的影响，体现了痹祺胶囊复方配伍的科学性。

试验结果充分体现了中医学的整体观念和辩证诊治的思想，药物通过合理配伍，可以增强或改变原有功用，调其偏性，消除或减缓对人体的不利因素，才能使各具特性的药物发挥综合治疗作用。以君、臣、佐、使原则为切入点，研究复方配伍后效应成分的药代动力学变化，结合化学成分研究和药理学研究，为阐明复方物质基础和作用机制提供现代科学依据。

刘昌孝院士认为，研究中药复方配伍间的规律，是当前中药现代化研究的重点之一，除配伍间的规律，各个成分在体内的药代动力学是痹祺胶囊现代化研究的又一新的方向。在此之后，他带领科研人员乘胜出发，向着更高更难的顶峰迈进。研究中，科学家们及时地将大量系统生物学、化学生物学的理论、方法，整合于中药复杂体系的疗效基础研究与疗效机制研究中，对痹祺胶囊主要化学成分的体内吸收、分布、代谢、排泄动力学进行更加深入地研究，这不仅是药代动力学最主要的研究内容，同时这项研究结论将会为痹祺胶囊更科学地临床应用提供理论依据。

痹祺配伍分析  镇痛抗炎免疫作用全

类风湿关节炎是以累及外周小关节为主的对称性多关节的慢性炎症性疾病，可有关节外的系统性损害。痹祺胶囊治疗类风湿关节炎在临床上已被广泛应用，有大量文献报道证明痹祺胶囊对膝骨性关节炎、镇痛、抗炎、调节免疫细胞等有明显疗效。

课题组人员采用大鼠关节炎实验模型，运用热板法和扭体法检测痹祺胶囊的镇痛作用，通过口服灌胃给予痹祺胶囊调制粉及拆方后按君、臣、佐、使不同配伍组合的调制粉，测定了实验性类风湿关节炎大鼠血清中类风湿因子、白介素、肿瘤坏死因子、干扰素、C反应蛋白的水平。通过研究，只有君药、臣药、佐药、使药共同配伍才能明确地发挥其镇痛消炎作用。实验充分证明了痹祺胶囊君药马钱子的止痛作用以及臣、佐、使与君药的协调、互补作用。

在与抗炎相关的免疫机制研究中，科研人员发现，痹祺胶囊能明显降低参与黏膜局部免疫的主要抗体以及血清中含量最高的免疫球蛋白。痹祺胶囊及其拆方组合参与了类风湿关节炎病程后期的发生与发展，对体液的免疫细胞具有明显的调节作用，其全方的免疫调节作用较君、臣、佐、使拆方配伍后作用更强。

药代动力学力证  痹祺神奇疗效

痹祺胶囊是治疗风湿类常见病和关节炎等慢性病的代表药方，临床效果确切，组方充分体现了中药复方的君、臣、佐、使配伍原则。由于痹祺胶囊复方组成多达十味中药，化学成分复杂，以其中一个或几个化学成分为检测指标，测得的药动学特征不一定能代表整方体内过程，若对每种成分都进行研究亦不可能。因此，选择整方药动学行为的代表指标成分十分关键。课题组将中医药君、臣、佐、使的组方原则与现代药理学的研究成果相结合，首选痹祺胶囊复方中君药的主要成分为指标，探讨配伍对其药动学行为的影响。

痹祺胶囊为口服给药，体内浓度较低，因此如何准确测定痹祺胶囊有效成分的血药浓度，全面描述其生物体内的ADME动态变化过程也是痹祺胶囊复方药代动力学研究的难点。液质联用技术（LC-MS）分析方法以其准确度好、灵敏度高而成为研究测定微量体内活性成分的关键技术和重要条件。

刘昌孝院士带领科研团队，结合课题组前期药效学研究及与CYP450酶相互作用的研究成果，以君臣佐使的组方配伍原则为基础，以君药主要效应成分为目标，对痹祺胶囊开展了药代动力学研究。

通过研究，揭示和分析了痹祺胶囊全方口服、君药马钱子给药后，士的宁和马钱子碱在大鼠体内的药代动力学特点，分析了君药马钱子及全方与化学单体的药动学参数差异。阐明痹祺胶囊复方配伍的相互作用，并从药物吸收和分布的角度，探讨复方配伍对士的宁和马钱子碱体内ADME过程影响的关键环节，为揭示痹祺胶囊复方配伍机制，阐明复方科学性，促进临床合理应用提供了可靠的科学依据，也为研究中药及其复方的药代动力学探索了思路。

给痹祺建指纹  彰显稳定质量

大家都知道，中药复方制剂异常复杂，每一味药都含有多个成分，且受多因素影响，其组分不稳定。如何才能准确地测量出药物有效成分、活性成分的疗效量值，使其形成稳定的质量标准，这是中药研究的普遍难题，给科研带来不小的挑战。

为此，刘昌孝院士带领科研团队集思广益，创新建立起了标准化提取十种单味药化学指纹的分析方法。采用高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法建立了制马钱子中的两种生物碱士的宁和马钱子碱，丹参中的七种酚酸类物质和甘草的化学指纹分析方法。该方法基本稳定，为下一步应用代谢组学方法进行代谢指纹研究，比较化学指纹和代谢指纹的差异，确定药物体内转化的特点和规律奠定了基础。

通过构建完善的体内外ADME/T评价体系，考察痹祺胶囊主要成分药物代谢稳定性、转运蛋白影响等性质，明确其在人体内的代谢酶谱、代谢产物谱以及代谢生物激活程度；同时深入开展各主要成分间药代动力学相互作用研究，给出组方配伍的依据；在此基础上，构建合适的计算模型，预测中药复杂成分体内药代动力学行为。为解释其对机体产生的深层次药效机理提供帮助。君药指纹成分的LC-MS分析和君药的代谢指纹LC-MS分析对于开展药代研究和代谢转化研究，认识药物的体内过程提供了技术支持和科学依据。

代谢酶做实验  再证配伍科学

“确有疗效的中药痹祺胶囊的药代动力学研究”以整体的观点出发建立中药药代动力学的实验和预测系统，提出具有创新理念的三维研究模式、技术路线和中药药代动力学的实验和预测系统，具有明显创新性，对我国中药复方的研究和开发起到了示范和标杆的作用。

细胞色素P450（简称CYP450）是一组结构和功能相关的超级家族基因编码的同工酶，属于含铁的血红蛋白酶，化学本质是蛋白质，不是一种单一的蛋白质。其广泛分布于各种生命体中，包括动物、植物、微生物。在哺乳动物中，CYP450主要分布于肝脏，在小肠、肺、肾、脑中也依次有少量分布。其在药物和其他异源性物质的生物代谢和生物转化的过程中都起着重要作用。

课题组的科研人员对痹祺胶囊组方配伍对CYP450酶活性的影响进行实验，意图从痹祺胶囊组方中不同药味如何影响君药对肝脏CPY450作用的角度，研究方剂中不同配伍组之间的相互作用，为全面评价痹祺胶囊的安全性和科学性打下基础。

研究体外吸收转运及其机理，马钱子及与健脾益气、活血药配伍体内药代动力学、代谢产物及代谢机理，在不同动物种属中研究药代差异，建立上述超微量体内成分分析方法，对痹祺胶囊方中健脾益气、活血药配伍和它们与马钱子及配伍进行研究，建立从动物过渡到人的信息，以达到运用生物学信息方法对痹祺胶囊复杂的药物体内过程预测的目的。通过研究，揭示出了痹祺胶囊的体内代谢过程和安全性，同时验证了痹祺胶囊配伍的精妙。

时间伴随着紧张的实验一天天过去，刘昌孝院士带领科研团队，在国家自然科学基金会重点资助的复方中药药代动力学研究“确有疗效的中药痹祺胶囊的药代动力学研究”课题组殚精竭虑，忘我拼搏。几番冬去春来，几番盛夏寒暑，难关被一个个突破，中药研究的空白被一个个填补。历时四年，带着累累硕果，课题终于结题了。2011年1月，“确有疗效的中药痹祺胶囊的药代动力学研究”项目通过国家验收。该研究通过整合体内外药代方法、生物信息学方法与系统生物学方法，以整体的观点出发，建立中药药代动力学的实验和预测系统，提出具有创新理念的三维研究模式、技术路线和中药药代动力学的实验和预测系统。用现代技术和语言解释和阐明了痹祺胶囊多靶点的作用机制，以及方剂的药代特点，成为中药国家级药研的里程碑。这个具有明显创新性的研究项目，得到了国家科技部等相关部门的高度评价。痹祺胶囊成为名副其实的现代中药研究的样本和“金标准”。